DIRAM

Dialogue Inter Règne et Applications Médicales

bertrand

 

Responsable de l’équipe: Pr. Bertrand TOUSSAINT (PU-PH, CHU – UJF)
Mail : btoussaint@chu-grenoble.fr
Tel :0476765568

Membre de l’équipe: Jadwiga Chroboczek (Dr Emerite CNRS), Audrey Le Gouëllec (MCU-PH), Vivien deloule (Doctorant), Oriane Moyne (Doctorante), Elodie Meynet (interne de pneumo, M2R), Candice Trocme 

Plan de recherche

L’équipe travaille depuis une dizaine d’année sur la virulence de Pseudomonas aeruginosa et sa relation avec l’immunité de l’hôte. Plus particulièrement Pr B. Toussaint responsable de l’équipe TheREx et Pr B. Polack étudiaient la régulation du système de sécrétion de type III, facteur de virulence majeur de ce pathogène nosocomiale opportuniste. Aujourd’hui, l’équipe a détourné l’utilisation du système SSTT de sa fonction première d’injection d’exotoxines, pour en faire une seringue d’injection de protéines d’intérêt thérapeutique dans les cellules eucaryotes. L’application principalement développée est la mise au point de vecteurs bactériens vivant atténués pour la délivrance d’antigène à des fins d’immunothérapie active.

L’équipe développe également l’utilisation d’autres outils de vectorisation de protéines comme les Virus like Particles (VLPs) dans des stratégies d’immunothérapies (apport d’antigènes), de développement d’approches cytotoxiques ciblées (cancer), ou de transformation de cellules (induction de pluripotence).

Mots clés: Immunothérapie, cancer, iPS, vecteur bactérien, relation hôte pathogène, virulence, système de sécretion de type III

Techniques:

  • Microbiologie: culture bactérienne, biologie de synthèse, déletion de gènes, test de sécrétion de protéines
  • Biologie moléculaire: clonage, mutagénèse
  • Biochimie: Production de protéines recombinantes, paramètre cinétique enzymatique, test d’inhibition
  • Expérimentation animale: injection, infection, prélèvement d’organes, …
  • Immunologie: analyse cytokines par Luminex, ELISpot, Analyse Tétramère, FACS

Publications récentes:

Berthoin, L., et al., Targeted release of transcription factors for cell reprogramming by a natural micro-syringe. Int J Pharm, 2016. 513(1-2): p. 678-687.

Bortolotti, P., et al., Tryptophan catabolism in Pseudomonas aeruginosa and potential for inter-kingdom relationship. BMC Microbiol, 2016. 16(1): p. 137.

Boulet, L., et al., Is tryptophan metabolism involved in sleep apnea-related cardiovascular co-morbidities and cancer progression? Med Hypotheses, 2015. 85(4): p. 415-23.

Genestet C, Le Gouellec A, Chaker H, Polack B, Guery B, Toussaint B, Stasia MJ. Scavenging of reactive oxygen species by tryptophan metabolites helps Pseudomonas aeruginosa escape neutrophil killing. Free Radic Biol Med. 2014 Jun 12;73C:400-410.

Szolajska E, Burmeister WP, Zochowska M, Nerlo B, Andreev I, Schoehn G, Andrieu JP, Fender P, Naskalska A, Zubieta C, Cusack S, Chroboczek The structural basis for the integrity of adenovirus Ad3 dodecahedron. J. PLoS One. 2012;7(9)

Toussaint B, Chauchet X, Wang Y, Polack B, Le Gouëllec A Live-attenuated bacteria as a cancer vaccine vector.Expert Rev Vaccines. 2013 Oct;12(10):1139-54.

Le Gouellec A, X. Chauchet, D. Laurin, C. Aspord, J. Verove, Y. Wang, C. Genestet, C. Trocme, M. Ahmadi, S. Martin, A. Broisat, F. Cretin, C. Ghezzi, B. Polack, J. Plumas and B. Toussaint. A safe bacterial micro-syringe for in vivo antigen delivery and immunotherapy. Mol Ther. 2013 May;21(5):1076-86.

Wang Y., Toussaint B.and Le Gouëllec A. Bacterial Vector for the delivery of Tumor Antigens. Methods Mol Biol. 2014;1139:429-41

Le Gouëllec A., X. Chauchet, Y. Wang, B. Polack, L. Buffat and B. Toussaint. Bacterial vectors for active immunotherapy reach clinical and industrial stages. Hum Vaccin Immunother.(2012) 8(10), 1454-1458.

Le Gouellec A., Polack B., Shen D. and B. Toussaint. The regulation of the expression of type three secretion systems: an example from Pseudomonas aeruginosa. Chapter manuscript in ASM Book Regulation of Bacterial Virulence Michael Vasil and Andrew Darwin, Editors (2012)

Wang Y., Le Gouellec A., Asri H., Chaker H. Polack B. and B. Toussaint. Optimization of anti-tumor immunotherapy mediated by type III secretion system-based live attenuated bacterial vectors (J. Immunother. (2012) Apr;35(3):223-34)

Derouazi M, Wang Y, Marlu R, Epaulard O, Mayol JF, Pasqual N, Le Gouellec A, Polack B, Toussaint B. Optimal epitope composition after antigen screening using a live bacterial delivery vector: application to TRP-2. Bioeng Bugs. 2010 Jan-Feb;1(1):51-60.

Epaulard, O, et al. (2008). Optimization of a type III secretion system-based Pseudomonas aeruginosa live vector for antigen delivery. Clin Vaccine Immunol15: 308-313.

Epaulard, O, et al. (2006). Anti-tumor immunotherapy via antigen delivery from a live attenuated genetically engineered Pseudomonas aeruginosa type III secretion system-based vector. Mol Ther14: 656-661.

Brevets:

  • A. Le Gouellec, B Polack, B Toussaint  Attenuated and adapted strain of P. aeruginosa for delivering antigens (PCT EP2012/075167) (2012).
  • B. Polack, B. Toussaint, L. Quénée. Outils de transfert et de production de protéines mettant en œuvre le SSTT de Pseudomonas (2005), WO2005049644.

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